Rapport d'essais n° RE20-0698-1 Laboratoire MIDAC – 85 C, rue Nelson Mandela – 59120 LOOS/LILLE – FRANCE Tél : +33 (0)3 20 90 52 55 – contact@midac-lab.fr SAS au capital de 80 000 € - R.C.S. LILLE Métropole 329 303 242 Evaluation de l'activité virucide selon la norme NF EN 14476+A2 : 2019 Produit : Processus global de lavage à froid, Générateur à ozone avec adjonction de produits lessiviel dédiés Lavage n°4: Lavage “OTEK” Textile de type couleur souillé Lot / Donneur d'ordre : GACHES CHIMIE SPECIALITES ACTIVITE ENTRETIEN TEXTILE 2 BIS CHEMIN DE LA SCIERIE FR 64800 OS MARSILLON Loos, le 09/09/2020 Le rapport d’essai comporte : 9 pages La reproduction de ce rapport d'essai n'est autorisée que sous sa forme intégrale. Ce rapport d'essai ne concerne que l’échantillon soumis à essais. LABORATOIRE MIDAC RE20-0698-1 Page 2 sur 10 1 PRINCIPE L'activité virucide a été déterminée selon la norme NF EN 14476+A2: "Antiseptiques et désinfectants chimiques — Essai quantitatif de suspension pour l'évaluation de l'activité virucide dans le domaine médical - Méthode d'essai et prescriptions (Phase 2/Étape 1)" - Juillet 2019. 2 IDENTIFICATION DE L’ECHANTILLON Produit : Lavage n°4: Lavage “OTEK” Textile de type couleur souillé Numéro de lot : Fabrication extemporanément – date d’expiration : non renseignée Fabricant : / : fournisseur : GACHES CHIMIE SPECIALITES Date de livraison : 17/06/2020 Conditions de stockage : Conditions de stockage: A temperature ambiante et à l’abri de la lumière. Diluant du produit recommandé par le fabricant : / Substance(s) active(s) et sa (ou leurs) concentration(s) : Non communiquée Aspect du produit : Test 1: Liquide incolore et homogène, Test 2 et Test 3: Liquide blanchatre et homogène. 3 CONDITIONS EXPERIMENTALES Date(s) des essais (période d’analyse) : Du 18/08/2020 au 08/09/2020 Diluant utilisé pour la solution d’essai du produit (eau dure ou eau distillée) : N/A. Concentrations d’essai du produit : voir tableau(x) page(s) suivante(s). Aspect des dilutions du produit : -Test 1 (COOL STAR 0,025g/L ; GARO BOOST 0,025g/L ; GAROSIVE DETER 0,025g/L; GAROBOOST 0,025g/L + PERACID FORTE 0,025g/L) : Liquide incolore homogène -Test 2 (COOL STAR 1,5g/L ; GARO BOOST 1,5g/L ; GAROSIVE DETER 1g/L; GAROBOOST 1g/L + PERACID FORTE 0,75g/L) : Liquide incolore homogène -Test 3 (COOL STAR 1,5g/L ; GARO BOOST 1,5g/L ; GAROSIVE DETER 1,5g/L; GAROBOOST 1,25g/L + PERACID FORTE 1,5g/L) : Liquide blanchatre homogène Température(s) d’essai : 20°C (± 1°C). Temps de contact: 7 minutes (+/- 10 secondes). Substance(s) interférente(s): albumine bovine 3 g/L avec érythrocytes de mouton 3 mL/L (conditions de saleté) Stabilité et aspect du mélange au cours du mode opératoire (noter la formation de tout précipité ou floculat) ; Pas de précipité observé au cours des essais, aucune réaction mise en évidence au cours des essais. Température d’incubation : 37°C (± 1°C) et 5 % CO2. Sous CO2 5%. Méthode de filtration : microfiltration Columns: Microspin TMS-400 HR columns Identification de la source de la souche virale et nombre de passages : Parvovirus Murin Mode opératoire pour arrêter l’action du produit : Microspin TMS-400 HR columns, selon le protocole du fabricant. Lignée cellulaire: nom, source, nombre de passages, milieu pour cultures cellulaires : A9 CCL1.4, p03, MEM 10%SVF, 1% AANE, 1%ATB, 1%L-Glu. LABORATOIRE MIDAC RE20-0698-1 Page 3 sur 10 4 METHODE D’ESSAI ET RESULTATS 1) Méthode : 1 part de substance interférente + 1 part de suspension virale + 8 parts du produit biocide sont mélangés et incubés au temps de contact et à la température définie. L’essai est validé par : -un test de cytotoxicité du produit -un test d’inactivation du produit -un test de sensibilité -un essai de référence d’inactivation du virus avec du formaldéhyde Après incubation, les titres infectieux sont calculés selon la méthode de Spearman et Kärber. 2) Résultats Titre de la suspension d’essai : 5,75E+00 log DITC50 Inactivation maximale détectable du virus 5,25E+00 log DITC50 Inactivation du virus lors de l’essai de référence pour l’inactivation du virus après 60 min : 2,38E+00 log DITC50 LABORATOIRE MIDAC RE20-0698-1 Page 4 sur 10 5 RESULTATS EXPERIMENTAUX a) Contrôle de la cytotoxicité du produit Cytotoxicité du produit (log DICT50) Technique par dilution 5,00E-01 Filtration sur Microspin TM S-400 HR columns 5,00E-01 Interprétation : Après dilution selon le protocole de la norme, la toxicité résiduelle du désinfectant est de 5,00E-01 log DICT50. La technique par filtration sur colonne Microspin TM S-400 HR réduit cette toxicité à 5,00E-01 log DICT50. b) Contrôle de la sensibilité des cellules au produit Sensibilité (log DICT50) Cellules traitées A 6,88E+00 Cellules non traitées B 6,00E+00 Interprétation : La différence entre les titres viraux sur cellules traitées (A) et cellules non traitées(B) doit être inférieure à 1 log afin de valider le test. c) Essai de réference pour l’inactivation du virus Produit Concentrations dans l’essai Substance interférente Titre viral (log DICT50) Reduction (log DICT50) Formaldehyde – 30 min 0.7% (v/v) PBS 3,63E+00 2,00E+00 Formaldehyde - 60 min 0.7% (v/v) PBS 3,25E+00 2,38E+00 Témoin viral formaldéhyde n.a PBS 5,63E+00 Interprétation : La différence entre le titre du témoin viral, exprimé en logarithme, et celui du microorganisme d’essai utilisé lors de l’essai de référence pour l’inactivation du virus est de 2,00E+00 après 30 min et de 2,38E+00 aprés 60min LABORATOIRE MIDAC RE20-0698-1 Page 5 sur 10 d) Contrôle de l’efficacité de l’arrêt du produit Produit Concentrations dans l’essai Substance interférente (log DICT50) Reduction (log DICT50) Neutralisation du produit Test 3 albumine bovine 3 g/L avec érythrocytes de mouton 3 mL/L (conditions de saleté). 5,00E+00 0,38E+00 Contrôle de neutralisation n.a albumine bovine 3 g/L avec érythrocytes de mouton 3 mL/L (conditions de saleté). 5,38E+00 Interprétation : Lors du contrôle de l’efficacité de l’arrêt de l’activité du produit, la différence de titre avec la suspension d’essai doit être ≤ 0.5 lg. e) Evaluation de l’activité virucide Produit Concentrations dans l’essai Substance interférente (log DICT50) Reduction (log DICT50) Lavage n°4: Textile de type couleur souillé: / Test 1 albumine bovine 3 g/L avec érythrocytes de mouton 3 mL/L (conditions de saleté). 4,25E+00 1,5E+00 Test 2 1,00E+00 4,75E+00 Test 3 5,00E-01 5,25E+00 Viral control T0 5,38E+00 Viral control Tmax 5,75E+00 Interprétation : Une concentration au moins par essai doit montrer une réduction de 4lg ou plus, et une concentration au moins doit montrer une réduction logarithmique inférieur à 4. LABORATOIRE MIDAC RE20-0698-1 Page 6 sur 10 6 VERIFICATION DE LA METHODOLOGIE Un essai n’est valable que si les critères suivants sont remplis: a/ le titre de la suspension d’essai d’au moins 1 x 10^8 DICT50/ml est suffisamment élevé pour permettre une réduction du titre d’au moins 4 lg afin de vérifier la méthode: la réduction de titre détectable doit être d’au moins 4 lg b/ la différence entre le titre du témoin viral, exprimé en logarithme, et le titre du virus dans l'essai d'inactivation de référence est comprise: entre –0,5 et –2,5 après 30 min et entre –2 et –4,5 après 60 min pour le poliovirus entre –3 et –5 après 30 min et entre –3,5 et –5,5 après 60 min pour l'adénovirus entre –1 et –3 après 30 min et entre –2 et –4 après 60 min pour le norovirus murin entre 0,0 et –2,0 après 30 min et entre –0,5 et –2,5 après 60 min pour le parvovirus entre –0,75 et –3,5 après 5 min et entre –2,0 et ≥ –4,0 après 15 min pour le virus de la vaccine c/ la cytotoxicité de la solution d’essai du produit n’affecte pas la morphologie et la croissance cellulaires ni la sensibilité au microorganisme d’essai dans les dilutions des mélanges d’essai qui sont nécessaires pour démontrer une réduction de 4 lg du titre viral d/ le titrage comparatif du virus sur les cultures cellulaires traitées avec des dilutions du mélange d’essai et en parallèle (c’est-à-dire ajout du tampon PBS uniquement) a pour résultat une différence < 1 lg du titre viral; e/ lors du contrôle de l’efficacité de l’arrêt de l’activité du produit), la différence de titre avec la suspension d’essai doit être ≤0,5 lg ; f/ une concentration au moins par essai doit montrer une réduction de 4 lg ou plus, et une concentration au moins doit montrer une réduction logarithmique inférieure à 4 7 CONCLUSION Selon la norme NF EN 14476+A2, le produit Lavage n°4: Lavage “OTEK” textile de type couleur souillé lot : / Présente une activité virucide - à la concentration de Test 2 en 7 minutes (+/- 10 secondes) à 20°C (± 1°C) au contact de albumine bovine 3 g/L avec érythrocytes de mouton 3 mL/L (conditions de saleté) , vis-à-vis de la souche : Parvovirus Murin LABORATOIRE MIDAC RE20-0698-1 Page 7 sur 10 Annexe : Données brutes Produit: Lavage n°4: Lavage “OTEK” Textile de type couleur souillé lot : / Produit Concentration Substance interférente Temps de contact 10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-6 10-7 10-8 Lavage n°4: Textile de type couleur souillé Test 3 albumine bovine 3 g/L avec érythrocytes de mouton 3 mL/L (conditions de saleté) n.a 00000000 00000000 00000000 00000000 00000000 00000000 00000000 00000000 Lavage n°4: Textile de type couleur souillé Microspin Test 3 albumine bovine 3 g/L avec érythrocytes de mouton 3 mL/L (conditions de saleté) n.a 00000000 00000000 00000000 00000000 00000000 00000000 00000000 00000000 Sensibilité des cellules Traité Test 3 albumine bovine 3 g/L avec érythrocytes de mouton 3 mL/L (conditions de saleté) 60min 44444444 44444444 33333333 33333333 22222222 11111111 00111000 00000000 Sensibilité des cellules Non traité n.a PBS 60min 33333333 22222222 22221112 22222222 11111111 00111100 00000000 00000000 Formaldehyde 30 min 0,7 % (v/v) PBS 30min 11111111 11111111 11111111 00000100 00000000 00000000 00000000 00000000 Formaldehyde 60min 0,7 % (v/v) PBS 60min 22222222 11111111 11110011 00000000 00000000 00000000 00000000 00000000 Formaldehyde control n.a PBS 60min 11111111 11111111 11111111 11111111 11101111 10100000 00000000 00000000 Cytotoxicité formaldéhyde 0.7%(v/v) PBS n.a 00000000 00000000 00000000 00000000 00000000 00000000 00000000 00000000 Viral control n.a albumine bovine 3 g/L avec érythrocytes de mouton 3 mL/L (conditions de saleté) 0 22222222 11111111 11111111 11111111 21011111 00000000 00000000 00000000 LABORATOIRE MIDAC RE20-0698-1 Page 8 sur 10 Viral control n.a albumine bovine 3 g/L avec érythrocytes de mouton 3 mL/L (conditions de saleté) 7 minutes (+/- 10 secondes). 22222222 11111111 11111111 11111111 11111111 00100001 00000000 00000000 Lavage n°4: Textile de type couleur souillé Test 1 albumine bovine 3 g/L avec érythrocytes de mouton 3 mL/L (conditions de saleté) 7 minutes (+/- 10 secondes). 22222222 11111111 11111111 00101110 10000010 00000000 00000000 00000000 Test 2 albumine bovine 3 g/L avec érythrocytes de mouton 3 mL/L (conditions de saleté) 7 minutes (+/- 10 secondes). 11000000 10000010 00000000 00000000 00000000 00000000 00000000 00000000 Test 3 albumine bovine 3 g/L avec érythrocytes de mouton 3 mL/L (conditions de saleté) 7 minutes (+/- 10 secondes). 00000000 00000000 00000000 00000000 00000000 00000000 00000000 00000000 Inactivation Test 3 albumine bovine 3 g/L avec érythrocytes de mouton 3 mL/L (conditions de saleté) 30min 11111111 11111111 11111111 11110011 11100010 00001010 00000000 00000000 Inactivation control n.a albumine bovine 3 g/L avec érythrocytes de mouton 3 mL/L (conditions de saleté) 30min 11111111 11111111 11111111 11111110 11101101 00000011 00000000 00000000 1 à 4 Virus présents. 1= 25% ECP et 4 = 100% ECP 0 Absence de virus n.a non applicable T: Toxique LABORATOIRE MIDAC RE20-0698-1 Page 9 sur 10 Annexe : Présentation graphique des résultats de l’essai a) Essai de réference pour l’inactivation du virus b) Evaluation de l’activité virucide du produit 5,751012345670 min7minlg DICT50Contact time Cytotoxicité du produitInactivation du virus5,633,633,130123456030min60minlg DICT50Contact timeInactivation du virus 0,7%(v/v) formaldehydeCytotoxicité du produit 0,7% (v/v) formaldehyde LABORATOIRE MIDAC RE20-0698-1 Page 10 sur 10 RÉVISIONS Date Nature de la modification Version n.a. n.a. n.a.
